輝駿生物具有三年SILAC服務經驗，顧客發(fā)表在權威期刊J.Proteome Res.上的主體數據出自本公司，提供Arg和Lys的L、M、H三種同位素氨基酸。

一、SILAC概述
         SILAC即細胞培養(yǎng)條件下穩(wěn)定同位素標記技術(Stable isotope labeling with amino acids in cell culture，SILAC)，其基本原理是在細胞培養(yǎng)時，采用含有輕、中、重同位素型必需氨基酸的培養(yǎng)基進行細胞培養(yǎng)，用于SILAC主要的穩(wěn)定同位素氨基酸是Lys和Arg, 細胞在傳代培養(yǎng)過程中同位素氨基酸將被細胞用于合成蛋白質，細胞經傳代培養(yǎng)5-6代后，細胞的所有蛋白質將被同位素標記，等量混合標記的蛋白質后經過SDS-PAGE分離和質譜分析，通過比較一級質譜圖中三個同位素型肽段的面積大小進行相對定量，同時二級譜圖對肽段進行序列測定從而鑒定蛋白質。
         由于SILAC標記技術是體內標記技術，幾乎不影響細胞的功能，同時靈敏度高，因此其在蛋白質組學相關領域中得到了廣泛的應用，如比較蛋白質組學，蛋白質與蛋白質相互作用，蛋白質與DNA相互作用，蛋白質與RNA相互作用等領域。
 
二、與體外標記技術相比，SILAC屬于體內標記，具有以下技術優(yōu)勢:
  1、高通量，可同時鑒定并定量數百至數千種蛋白質；
  2、定量精確，降低由于樣品制備不同而造成的實驗差異；
  3、線性定量范圍廣；
  4、靈敏度更高，蛋白質需要量明顯減少；
  5、標記采用的是體內標記技術，更接近樣品真實狀態(tài)。
 
三、SIALC技術服務流程
 
 
四、SILAC技術服務內容
  1、細胞同位素標記；
  2、樣本制備與定量；
  3、SDS-PAGE分離；
  4、胰酶酶切后液相分離和質譜分析；
  5、數據庫檢索；蛋白質定量分析；
  6、相關生物信息學分析；
  7、實驗報告提交。
 
五、送樣須知
  1、技術咨詢：在您開始實驗之前，本公司將為您竭誠提供最有效的SILAC實驗設計方案，本公司提供Lys和Arg均為L、M 、H標記的氨基酸。
  2、為了保證SILAC實驗能順利進行，樣品寄送需滿足以下要求：
   基本要求：SILAC實驗僅適用于能在SILAC培養(yǎng)基中培養(yǎng)的材料，具體情形請咨詢本公司。
   運輸要求：液氮或干冰保存寄送，廣州本地客戶可上門收樣。
   注：樣本應避免各類污染和反復凍融。
 
六、實驗報告內容
  1、蛋白定鑒定和SILAC定量分析結果；
  2、顧客指定蛋白質對應的質譜峰圖；
  3、SILAC實驗完整的實驗步驟、使用儀器、軟件檢索參數等。
 
七、SIALC技術服務案例

 

八、服務周期及收費標準： 歡迎登陸： www.fitgene.com  服務熱線 400-699-1663

十、質量承諾
  1、嚴謹的SILAC實驗設計方案確保定量分析結果可靠；
  2、提供客觀的SILAC實驗分析結果。